Phân tích phần đông lạnh | Mô học

Phân tích phần đông lạnh

Điều này là cần thiết nếu bác sĩ phẫu thuật cần thông tin về mô được lấy ra trong một cuộc phẫu thuật để quyết định về quá trình của thủ thuật. Ví dụ, một khối u ác tính nhỏ được loại bỏ khỏi thận. Bây giờ, một vết rạch nhanh chóng được yêu cầu để xem liệu khối u đã được loại bỏ hoàn toàn hay vẫn còn một lượng lớn mô ác tính ở rìa của các mẫu mô.

Cuối cùng, kết quả của việc kiểm tra phần đông lạnh xác định quá trình phẫu thuật và kế hoạch điều trị tiếp theo của bệnh nhân. Khám nghiệm phần đông lạnh hoạt động như thế nào? Trong vòng 10 phút, mô được ổn định bằng cách đông lạnh ở -20 ° C, sau đó một vết rạch dày 5 - 10 μm được thực hiện trên cái gọi là microtome. Cái này được đặt trên một phiến kính, một tấm kính nhỏ, và nhanh chóng bị ố vàng. Cuối cùng, kết quả được kiểm tra dưới kính hiển vi và kết quả có thể được chuyển ngay đến phòng phẫu thuật.

Phương pháp nhuộm

Nhiều phương pháp nhuộm mô học đã phát triển trong 120 năm qua. Cấu trúc tế bào và mô được chia thành các tế bào ưa bazơ, ưa axit và bạch cầu trung tính dựa trên phản ứng màu với các chất nhuộm màu. Hơn nữa, cũng có cấu trúc agyrophilic và nucleophilic.

Basophilic nhuộm mọi thứ có chứa nhóm axit và được nhuộm bằng thuốc nhuộm cơ bản (ví dụ hematoxylin hoặc xanh methylen). Các cấu trúc ưa axit là bazơ và do đó có thể bị nhuộm bằng xói mòn hoặc axit fuchsin (thuốc nhuộm axit). Chúng bao gồm tế bào chất và collagen sợi.

Các thành phần bạch cầu trung tính hoặc ưa béo không thể phản ứng với thuốc nhuộm có tính axit hoặc bazơ và do đó không thể bị nhuộm màu. Các thành phần agyrophilic có thể liên kết các ion bạc và chuyển chúng thành bạc nguyên tố. Phản ứng màu nucleophin (nhân = nhân tế bào, nhân tế bào ưa thích) tạo ra phản ứng màu từ thuốc nhuộm nucleophin trong nhân tế bào.Đây là các chất liên kết DNA hoặc các chất cơ bản liên kết với các axit nucleic.

Ngày nay, các phương pháp nhuộm hóa học đã được thử nghiệm tốt đã được bổ sung bằng các phương pháp miễn dịch học. Phản ứng kháng nguyên-kháng thể được sử dụng trong kỹ thuật này để phát hiện một số đặc tính của tế bào. Phản ứng sau đó có thể được hiển thị bằng một kỹ thuật tinh vi.

Các phương pháp nhuộm thường được sử dụng là: Nhuộm HE = Nhuộm Hematoxylin-Eosin: Hematoxylin, một loại thuốc nhuộm tự nhiên, nhuộm tất cả các cấu trúc có màu xanh lam, có tính bazơ (= ưa bazơ) và do đó có tính axit, chẳng hạn như DNA, nhân tế bào, ribosome, v.v. Eosin, mặt khác, được sản xuất tổng hợp. Eosin nhuộm đỏ tất cả các cấu trúc tế bào nếu chúng ưa axit (= ưa axit) hoặc bazơ.

Sản phẩm protein của tế bào chất, mitochondriacollagen nằm trong số đó. Nhuộm azan: Nó bao gồm các chữ cái đầu tiên của cả hai màu, azocarmine G và màu cam vàng xanh anilin: Đây là vết bẩn nhân tế bào và các sợi cơ có màu đỏ và tế bào chất có màu đỏ. Collagen và sợi lưới chuyển sang màu xanh lam trong quá trình nhuộm này.

Vết Giemsa (Giemsa's Azure-Eosin-Methylene Blue) được sử dụng để nhuộm máu vết bẩn tế bào. Có thể dễ dàng nhận ra nhân tế bào bằng phản ứng tạo màu tím. Tế bào chất nhuộm màu hơi xanh.

Khi nhuộm thun (resorcinol-fuchsin-orcein), tất cả các sợi đàn hồi đều có màu tím đen. Phương pháp nhuộm van Gieson có đặc điểm là nhuộm được thực hiện đầu tiên với hematoxylin. Sau đó, axit picric fuchsin (vi fuchsin) hoặc axit picric thiazine được sử dụng.

Cuối cùng, nhân tế bào có màu nâu đen, tế bào chất có màu nâu nhạt. Chống thấm với thiazine axit picric làm ố các sợi đàn hồi và mô cơ có màu vàng cam và các sợi collagen có màu đỏ. Trong phương pháp nhuộm trichrome theo Masson-Goldner, kích thước của phân tử thuốc nhuộm là yếu tố quan trọng nhất trong phương pháp nhuộm.

Hematoxiline sắt được sử dụng, thường có thêm ba loại thuốc nhuộm, cụ thể là acid fox, màu cam G và màu xanh lục nhạt. Nó nhuộm màu cắt dán mô liên kết và chất nhầy màu xanh lá cây, nhân tế bào xanh đen, tế bào chất đỏ, cơ màu đỏ nhạt và đỏ máu ô (hồng cầu) đỏ cam. Ngoài ra, còn có phương pháp nhuộm Gram, dùng để phân biệt vi khuẩn.

Gram dương vi khuẩn vi khuẩn Gram âm nhuộm màu xanh lam và vi khuẩn Gram âm nhuộm màu đỏ. Nhuộm Ziehl-Neelsen cũng được sử dụng cho vi khuẩn, cụ thể là những chất có khả năng chống axit và, ví dụ, cho thấy bệnh lao mầm bệnh có màu đỏ. Các phương pháp nhuộm khác cần được đề cập ở đây là phản ứng Berlin-Blue, chịu trách nhiệm phát hiện các ion sắt hóa trị ba trong các phần mô, và phương pháp nhuộm sắt hematoxylin theo Heidenhain.