Lai huỳnh quang tại chỗ (FISH) là một phương pháp sàng lọc di truyền để phát hiện DNA (axit deoxyribonucleic) trong nhân của các tế bào riêng lẻ.
Phương pháp này liên quan đến việc sử dụng các đầu dò DNA cụ thể chỉ có thể cung cấp thông tin về các vùng gen mà đầu dò được sử dụng là cụ thể.
Chỉ định (lĩnh vực ứng dụng)
- Nghi ngờ về sai số nhiễm sắc thể:
- Phát hiện các bất thường về số lượng nhiễm sắc thể (ví dụ: thể tam nhiễm 21).
- Để định lượng hình ghép cho quang sai nhiễm sắc thể (ví dụ: ở Ullrich-Hội chứng Turner).
- Phát hiện các vi lượng (ví dụ: monosomy 22q11.2).
- Phát hiện các sai lệch nhiễm sắc thể (ví dụ: bệnh bạch cầu lymphocytic mãn tính (CLL), không Hodgkin lymphoma).
Các chỉ định trên được phân tích bằng FISH giữa các giai đoạn (xem “Quy trình trong phòng thí nghiệm” để biết thêm chi tiết).
các thủ tục
Vật liệu cần thiết
- Máu heparin (tối thiểu 1-2 ml)
Chuẩn bị của bệnh nhân
- Không cần thiết
Các yếu tố gây rối
- Không ai biết
Phương pháp phòng thí nghiệm
Lai huỳnh quang tại chỗ (FISH) liên quan đến việc sử dụng các đầu dò DNA được đánh dấu huỳnh quang (đầu dò FISH). Chúng có thể liên kết với một vị trí DNA cụ thể trên nhiễm sắc thể, được gọi là lai ghép. Khi hoặc sau khi gắn đầu dò được gắn nhãn huỳnh quang, việc đánh giá có thể được thực hiện bằng kính hiển vi. Trong quá trình này, số lượng tín hiệu huỳnh quang trong các hạt nhân giữa các pha được xác định. Hơn nữa, đánh giá vị trí (ví dụ như chuyển vị / chuyển vị trí / sang một nhiễm sắc thể khác) tại siêu âm nhiễm sắc thể có khả năng.
Khi huỳnh quang khác nhau thuốc nhuộm được sử dụng cho các DNA mục tiêu khác nhau trong quy trình FISH, nó được gọi là FISH nhiều màu. Điều này cho phép hình dung đầy đủ về bộ gen.
Trong một số trường hợp, mẫu dò DNA không được đánh dấu trực tiếp bằng thuốc nhuộm huỳnh quang, quy trình này được gọi là quy trình gián tiếp. Thay vào đó, nó được dán nhãn với các chất như biotin hoặc digoxigenin. Phương pháp này được coi là phức tạp hơn nhưng nhạy cảm hơn.
