Hình thái tế bào bạch cầu, Kính hiển vi tương phản pha

Kính hiển vi tương phản pha là một quy trình chẩn đoán được sử dụng trong tiết niệu và thận học (nghiên cứu về thận) để kiểm tra và đánh giá các bệnh phẩm quan trọng về tế bào học (bệnh phẩm có tế bào sống) trong chẩn đoán đái máu và cặn lắng trong nước tiểu. Tầm quan trọng nổi bật của phương pháp này đặc biệt là dựa vào khả năng, liên quan đến chẩn đoán, đánh giá hình thái hồng cầu (hình dạng của màu đỏ máu tế bào), có thể cung cấp thông tin có giá trị về nguồn gốc của chứng tiểu máu có thể xảy ra (tiểu ra máu) hoặc tiểu hồng cầu (hồng cầu trong nước tiểu). Kính hiển vi tương phản pha trầm tích nước tiểu là lý tưởng để đánh giá các dạng khác nhau của hồng cầu.Giới thiệu của Kính hiển vi tương phản pha Việc đưa vào chẩn đoán thông thường có thể được coi là một bước tiến lớn, vì nó giúp dễ dàng phân biệt các thành phần nước tiểu có bệnh lý với các thành phần không phải bệnh lý. Kính hiển vi tương phản pha ưu việt hơn kính hiển vi trường sáng, được sử dụng cho đến khi ra đời kính hiển vi tương phản pha, liên quan đến việc phân biệt các hiện vật. Nếu phát hiện không rõ ràng hoặc không thể kết luận, dùng đến thủ thuật này có thể tiết kiệm các biện pháp ít hữu ích hơn như chẩn đoán bằng X quang hoặc soi bàng quang (soi bàng quang) đối với tiểu máu cầu thận (xem bên dưới), do đó giảm chi phí và tiết kiệm thời gian điều trị.

Chỉ định (lĩnh vực ứng dụng)

Kính hiển vi tương phản pha được sử dụng trong tiết niệu và thận học để nghiên cứu hình thái hồng cầu:

• Đánh giá các bệnh phẩm quan trọng về tế bào học trong tiểu máu và chẩn đoán cặn nước tiểu. Chỉ định:> 6-8 hồng cầu/ l có thể phát hiện trong nước tiểu hoặc xét nghiệm vệt dương tính. Trong bối cảnh hình thái hồng cầu, việc phân biệt tiểu máu cầu thận với tiểu hồng cầu không do thận được thực hiện bằng cách phát hiện rối loạn hình thái (cầu thận) và tiểu máu. hồng cầu.
• Đái máu đa dạng có nguồn gốc từ cầu thận được tìm thấy ở những bệnh nhân có màng và viêm cầu thận tăng sinh màng, cũng như bệnh thận IgA, xơ cứng thận khu trú và phân đoạn, và viêm thận lupus. Trong tiểu máu cầu thận, hồng cầu bị ép qua màng đáy của mao mạch cầu thận bị tổn thương, gây tổn thương. Về mặt vi thể, người ta nhận ra hồng cầu đa hình, còn được gọi là hồng cầu acanthocytes (= hồng cầu có “tai chuột Mickey”).
• Đái máu đại thể (đái máu sau cầu thận) được tìm thấy ở những bệnh nhân bị nang thận vỡ vào hệ thống rỗng, bàng quang bệnh bạch tạng, máu phụ gia từ âm đạo (âm đạo), chấn thương sau khi đặt ống thông bàng quang, máu rối loạn đông máu, v.v.

các thủ tục

Nguyên tắc của kính hiển vi tương phản pha dựa trên sự giao thoa của các tia sáng trong đường truyền của kính hiển vi, có thể thu được hình ảnh có độ tương phản cao của các tế bào không bị nhuộm màu. Cấu tạo và chức năng của kính hiển vi tương phản pha:

• Khẩu độ hình khuyên, bình ngưng, tấm pha hình khuyên và vật kính có tầm quan trọng đặc biệt đối với chức năng của kính hiển vi tương phản pha. Bằng cách đưa khẩu độ hình khuyên vào bộ ngưng tụ và tấm pha vào vật kính, sẽ tạo ra sự phân tách các tia sáng không nhiễu xạ và nhiễu xạ. Kết quả là độ trễ bước sóng của các tia sáng nhiễu xạ gây ra sự lệch pha về mặt quang học làm cho các chi tiết cấu trúc của vật thể hiển vi đang được kiểm tra có vẻ tối hơn so với môi trường xung quanh. Về mặt thể chất, giai đoạn tiểu cầu chuyển đổi pha hoặc chênh lệch đường dẫn thành chênh lệch biên độ. Kết quả của sự khác biệt về biên độ này, hình ảnh của vật thể xuất hiện trong kính hiển vi bằng cách triệt tiêu lẫn nhau hoặc khuếch đại các tia sáng trực tiếp đi qua vật thể và bị nhiễu xạ tại vật thể.
• Do đó, một nhược điểm của nguyên tắc này là thực tế là các chuẩn bị pha lý tưởng không phải là quy tắc, vì các hiệu ứng biên độ thường được chồng lên các hiệu ứng pha.
• Dựa trên nguyên tắc chụp ảnh các cấu trúc bằng sự khác biệt về biên độ, các cấu trúc tế bào hiện có được biểu diễn dưới dạng các sắc thái xám được phân loại tùy thuộc vào quang học của chúng mật độ. Để cải thiện sự tái tạo của các cấu trúc, việc sử dụng các chế phẩm mỏng và pha tiểu cầu được chỉ định. Tùy thuộc vào bản chất của các giai đoạn khác nhau tiểu cầu, có thể đạt được cả độ tương phản pha dương và âm, dẫn đến các đối tượng quan tâm được hiển thị tối hơn hoặc sáng hơn môi trường xung quanh.
• Trong kính hiển vi tương phản pha, điều quan trọng hơn nữa cần lưu ý rằng hoại tử (tế bào chết) có thể xảy ra tương đối nhanh do tiếp xúc với ánh sáng và làm tổn thương thêm các tế bào quan trọng. Kết quả của sự nhanh chóng này hoại tử phát triển, việc đánh giá các trang trình bày phải được thực hiện trong vòng một đến hai giờ để duy trì hiệu lực của biện pháp chẩn đoán. Do đó, giới hạn thời gian này đối với việc đánh giá các mẫu vật quan trọng thường yêu cầu lập hồ sơ bằng phương pháp quang vi hoặc, nếu cần, bằng cách thực hiện quay phim vi mô. Máy ảnh vi mô là một bức ảnh chụp một hình ảnh hiển vi được chụp bằng một máy ảnh gắn với kính hiển vi. Thông qua kỹ thuật quay phim vi mô, có khả năng thu được các đối tượng dưới sự quan sát của kính hiển vi trong các hình ảnh chuyển động.