Soi cản quang pha là một thủ thuật chẩn đoán không thể thiếu trong sản phụ khoa, tạo điều kiện thuận lợi cho việc kiểm tra các tế bào quan trọng trong chất nhầy cổ tử cung (chất nhầy cổ tử cung) và chất tiết âm đạo (dịch âm đạo). Ngoài ra, quy trình này cũng cho phép đánh giá tinh trùng (tế bào tinh dịch).
Chỉ định (lĩnh vực ứng dụng)
- Chẩn đoán hệ thực vật âm đạo - khi kiểm tra hệ vi khuẩn âm đạo (hệ vi khuẩn âm đạo), có thể thực hiện các xét nghiệm sau bằng kính hiển vi tương phản pha: ví dụ, chẩn đoán thiếu vi khuẩn khu trú hoặc hệ vi khuẩn âm đạo bình thường (axit lactic vi khuẩn) có thể có hoặc không có sự phân hủy tế bào (phá hủy tế bào) với sự trợ giúp của quy trình chẩn đoán này. Hơn nữa, có thể xác định vi khuẩn trong việc chuẩn bị và phân loại chúng thành các nhóm vi khuẩn bất động và di động. Ngoài ra, các loại trùng roi như Trichomonas vaginalis, thuộc nhóm ký sinh trùng, thường có thể được phát hiện một cách đáng tin cậy bằng kính hiển vi tương phản pha. Hơn nữa, mycoses (bệnh nấm) có thể được phát hiện một cách đáng tin cậy trong kính hiển vi tương phản pha, do đó, chẩn đoán nấm nấm có thể được thực hiện với sự hỗ trợ của kính hiển vi tương phản pha. Dựa trên những khả năng chẩn đoán này, thường có thể phát hiện ra nguyên nhân gây nhiễm trùng cổ tử cung do vô trùng.
- Dấu hiệu viêm - bằng kính hiển vi tương phản pha, số lượng và loại bạch cầu (hình thái bạch cầu) có thể được xác định.
- Xác định giai đoạn chu kỳ - tế bào học âm đạo được sử dụng để xác định các giai đoạn chu kỳ của chu kỳ kinh nguyệt. Trong bước kiểm tra này, các tế bào bề ngoài (bề mặt) của âm hộ (âm đạo) được kiểm tra bằng kính hiển vi. Đánh giá tế bào cung cấp thông tin về giai đoạn chu kỳ kinh nguyệt hiện tại của người phụ nữ. Chu kỳ của phụ nữ được chia thành hai giai đoạn, giai đoạn đầu tiên được gọi là giai đoạn nang trứng (giai đoạn trưởng thành của trứng) và giai đoạn chu kỳ thứ hai được gọi là giai đoạn hoàng thể (corpus giai đoạn hoàng thể). Tuy nhiên, cần lưu ý rằng việc xác định pha chu kỳ bằng kính hiển vi tương phản pha hiện đã được thay thế phần lớn bằng chẩn đoán hormone, điều này đảm bảo mức độ chắc chắn cao trong chẩn đoán.
- Kiểm tra Sims-Huhner - quy trình kiểm tra này, còn được gọi là kiểm tra sau coital, được sử dụng để xác định xem tinh trùng (tế bào tinh trùng) có thể xâm nhập vào chất nhầy cổ tử cung (chất nhầy cổ tử cung) để đến nơi thụ tinh.
- Đánh giá về tinh trùng - Ngoài việc đánh giá khả năng tinh trùng xâm nhập (đi qua) chất nhầy cổ tử cung, kính hiển vi cản quang có thể kiểm tra sâu hơn số lượng tinh trùng, khả năng di chuyển và hình thái (ngoại hình) của chúng.
- Kiểm tra chất nhờn - trong trường hợp nghi ngờ, chẳng hạn như bệnh nấm (bệnh nấm), có khả năng phết tế bào âm hộ (âm đạo) hoặc âm hộ (tổng thể các cơ quan sinh dục chính bên ngoài của phụ nữ. Nó bao gồm môi và âm vật) hoặc có thể từ vùng hậu môn để lấy và đánh giá bằng kính hiển vi.
Chuẩn bị microspie tương phản pha bằng cách sử dụng ví dụ đánh giá dịch tiết âm đạo hiện có:
- Khi bắt đầu đánh giá dịch tiết âm đạo bằng kính hiển vi tương phản pha, việc chuẩn bị hai chế phẩm bản địa thích hợp (chế phẩm tươi, chưa đóng rắn, thường là không nhuộm dịch cơ thể, các mô hoặc nội tạng để phát hiện mầm bệnh sống bằng kính hiển vi) phải được thực hiện.
- Việc bổ sung kali dung dịch hydroxit (KOH) và muối ăn đến dịch tiết âm đạo được thực hiện. Sau khi trộn xong, dịch tiết kết hợp được bôi vào một phiến kính và được phủ bằng một tấm bìa. Sau đó, đánh giá hiển vi tương phản pha có thể được thực hiện.
các thủ tục
Nguyên tắc của kính hiển vi tương phản pha dựa trên sự giao thoa của các tia sáng trong đường truyền của kính hiển vi, có thể thu được hình ảnh có độ tương phản cao của các tế bào không bị nhuộm màu. Cấu tạo và chức năng của kính hiển vi tương phản pha:
- Khẩu độ hình khuyên, tụ điện, tấm pha hình khuyên và vật kính đặc biệt quan trọng đối với chức năng của kính hiển vi tương phản pha. Bằng cách đưa khẩu độ hình khuyên vào bộ ngưng tụ và tấm pha vào vật kính, sẽ tạo ra sự phân tách các chùm ánh sáng không nhiễu xạ và nhiễu xạ. Kết quả là độ trễ bước sóng của các tia sáng nhiễu xạ gây ra sự lệch pha về mặt quang học làm cho các chi tiết kết cấu của vật thể hiển vi cần kiểm tra có vẻ tối hơn so với môi trường xung quanh. Về mặt thể chất, giai đoạn tiểu cầu chuyển đổi pha hoặc chênh lệch đường dẫn thành chênh lệch biên độ. Kết quả của sự khác biệt về biên độ này, hình ảnh của vật thể xuất hiện trong kính hiển vi bằng cách triệt tiêu lẫn nhau hoặc khuếch đại các tia sáng trực tiếp đi qua vật thể và bị nhiễu xạ tại vật thể.
- Do đó, một nhược điểm của nguyên tắc này là thực tế là các chuẩn bị pha lý tưởng không phải là quy tắc, vì các hiệu ứng biên độ thường được chồng lên các hiệu ứng pha.
- Dựa trên nguyên tắc chụp ảnh các cấu trúc bằng sự khác biệt về biên độ, các cấu trúc tế bào hiện có được biểu diễn dưới dạng các sắc thái xám được phân loại tùy thuộc vào quang học của chúng mật độ. Để cải thiện sự tái tạo của các cấu trúc, việc sử dụng các chế phẩm mỏng và pha tiểu cầu được chỉ dấu. Tùy thuộc vào bản chất của các giai đoạn khác nhau tiểu cầu, có thể đạt được cả sự tương phản pha âm và dương, dẫn đến các đối tượng quan tâm được hiển thị tối hơn hoặc nhạt hơn so với môi trường xung quanh chúng.
- Trong kính hiển vi tương phản pha, cũng cần lưu ý rằng hoại tử (tế bào chết) có thể xảy ra tương đối nhanh do tiếp xúc với ánh sáng và làm tổn thương thêm các tế bào quan trọng. Kết quả của sự nhanh chóng này hoại tử phát triển, việc đánh giá các trang trình bày phải được thực hiện trong vòng một đến hai giờ để duy trì hiệu lực của biện pháp chẩn đoán. Do đó, giới hạn thời gian này đối với việc đánh giá các mẫu vật quan trọng thường yêu cầu tài liệu bằng chụp ảnh vi mô hoặc, nếu cần, bằng cách thực hiện quay phim vi mô. Máy ảnh vi mô là một bức ảnh chụp một hình ảnh hiển vi được chụp bằng một máy ảnh gắn với kính hiển vi. Thông qua kỹ thuật quay phim vi mô, có khả năng thu được các đối tượng dưới sự quan sát của kính hiển vi trong các hình ảnh chuyển động.
Ưu điểm của kính hiển vi tương phản pha:
- Chẩn đoán ngay lập tức - tiết kiệm thời gian và không tốn kém để thực hiện.
- Tương đối dễ thực hiện và do đó có thể dạy và học nhanh chóng.
- Tùy thuộc vào kinh nghiệm của điều tra viên với độ nhạy tương đối tốt (tỷ lệ phần trăm bệnh nhân bị bệnh được phát hiện bằng cách áp dụng quy trình, tức là phát hiện dương tính) và độ đặc hiệu (xác suất mà những người thực sự khỏe mạnh không mắc bệnh bệnh được đề cập cũng được phát hiện là khỏe mạnh bằng quy trình)
- Chẩn đoán có thể thực hiện được mà không cần sự hỗ trợ từ bên ngoài (tức là không cần phòng thí nghiệm của bên thứ ba).
