Xét nghiệm FISH là một xét nghiệm nhiễm sắc thể hiển vi được sử dụng trong chẩn đoán trước khi sinh và ung thư biểu mô ung thư vú, ung thư dạ dày và lymphocytic mãn tính bệnh bạch cầu. Xét nghiệm, kết quả có sẵn trong vòng 1 đến 2 ngày, có thể phát hiện chủ yếu các bất thường nhiễm sắc thể do một bộ nhiễm sắc thể bị thay đổi của một số nhiễm sắc thể. Thử nghiệm được thực hiện độc quyền như một thử nghiệm đồng hành hoặc thử nghiệm sơ bộ cho một chi tiết phân tích nhiễm sắc thể, kết quả có thể không có cho đến 2 đến 3 tuần sau khi tế bào được thu hoạch.
Bài kiểm tra FISH là gì?
Trong xét nghiệm, kết quả có sẵn trong vòng 1 đến 2 ngày, có thể phát hiện chủ yếu các bất thường về nhiễm sắc thể do một tập hợp bị thay đổi nhiễm sắc thể của một số nhiễm sắc thể nhất định. Bài kiểm tra FISH (lai huỳnh quang tại chỗ) trong chẩn đoán trước khi sinh cho phép rút ra kết luận về bộ nhiễm sắc thể bị thay đổi trong trường hợp nhất định nhiễm sắc thể. Để thực hiện xét nghiệm FISH, ít nhất 50 tế bào bào thai không nuôi cấy (tế bào ối) được lấy từ nước ối (khoảng 2 - 3 ml) là bắt buộc. Một phương pháp thay thế để có được các tế bào phù hợp là lấy mẫu nhung mao màng đệm, trong đó các ô được lấy bởi sinh thiết từ khu vực của dây rốn tập tin đính kèm. Một quy trình đặc biệt cho phép các sợi riêng lẻ của nhiễm sắc thể 13, 18, 21 và các nhiễm sắc thể X và Y được phân biệt với nhau bằng màu huỳnh quang, do đó, bất kỳ thể ba nhiễm nào đều được biểu thị bằng sự hiện diện của ba thay vì hai sợi tương đồng của nhiễm sắc thể. . Trong dạ dày và ung thư vú, xét nghiệm FISH có thể được sử dụng để kiểm tra xem liệu khối u có nhiều hơn hai bản sao của HER2 / neu gen (thụ thể yếu tố tăng trưởng biểu bì của con người), có hậu quả đối với loại hóa trị. Trong bệnh lymphocytic mãn tính bệnh bạch cầu bệnh, nhiều phân tích xét nghiệm FISH về tủy xương và ngoại vi máu các mẫu có thể xác định sự thay đổi nhiễm sắc thể phổ biến nhất ở các gen cụ thể, điều này cũng có ý nghĩa đối với điều trị.
Chức năng, tác dụng và mục tiêu
Các nhiễm sắc thể trong các nhân cô lập được tạo ra để tách cấu trúc xoắn kép của chúng bằng cách xử lý hóa học đặc biệt hoặc bằng cách tiếp xúc với nhiệt và các đầu dò DNA cụ thể về nhiễm sắc thể, mỗi đầu dò có trình tự DNA bổ sung, kết nối với các nhiễm sắc thể cụ thể “của chúng”. Các đầu dò DNA được đánh dấu bằng các màu huỳnh quang khác nhau để phần mềm đặc biệt có thể được sử dụng để phân biệt các nhiễm sắc thể được đánh dấu với nhau và đếm chúng trong một quy trình tự động. Được biết đến là ví dụ trisomies, trong đó ba thay vì hai sợi nhiễm sắc thể được tìm thấy cho một nhiễm sắc thể. Cái gọi là đơn nguyên cũng được biết đến, trong đó chỉ có một sợi của nhiễm sắc thể X hiện diện cũng như ba hoặc bốn sợi tương đồng của tất cả các nhiễm sắc thể. Các bất thường nhiễm sắc thể quan trọng nhất có thể được phát hiện bằng xét nghiệm FISH trong chẩn đoán trước sinh là Ullrich Hội chứng Turner (đơn bội X), hội chứng ba X (tam nhiễm hoặc đa bội thể X), Hội chứng klinefelter, trong đó một nhiễm sắc thể X bổ sung (XXY thay vì XY) hiện diện trong tất cả hoặc một phần của tế bào sinh dưỡng ở trẻ trai, Hội chứng Down (tam nhiễm sắc thể 21), hội chứng Edwards (tam nhiễm 18), và hội chứng Pätau (tam nhiễm 13). Monosomy X, trong đó các bé gái chỉ có một nhiễm sắc thể X, thường gây chết người, có nghĩa là trong khoảng 98% trường hợp, nó dẫn đến sẩy thai trong vòng ba tháng đầu tiên mang thai. Trong trường hợp vẫn sinh đẻ thì các bé gái có tuổi thọ bình thường, trí tuệ trung bình, nhưng thường mắc một số dị tật. Nội tạng và thường là vô sinh. Hội chứng Triple X với bộ nhiễm sắc thể XXX) cũng chỉ ảnh hưởng đến các bé gái. Bình thường mang thai và sinh có thể. Những phụ nữ cao lớn với bộ ba nhiễm sắc thể X có thể sống bình thường và thường không có biểu hiện bất thường về thể chất, nhưng học tập khó khăn không phải là hiếm và các vấn đề với các kỹ năng vận động tinh xảy ra. Hội chứng klinefelter, chỉ có thể ảnh hưởng đến con trai và nam giới, được đặc trưng bởi một nhiễm sắc thể X bổ sung có trong tất cả các tế bào cơ thể hoặc chỉ một phần. Các đặc điểm ngoại hình bao gồm chiều cao trên mức trung bình, tay và chân dài bất thường. Hội chứng klinefelter thường dẫn đến giảm sự phát triển của tinh hoàn với giảm testosterone bài tiết.Hội chứng Down, đồng nghĩa với trisomy 21, thường liên quan đến các đặc điểm thể chất nhất định và suy giảm nhận thức. Có nhiều dạng trisomy 21 khác nhau, trong đó cái gọi là trisomy 21 tự do chiếm ưu thế với khoảng 95% các trường hợp. Trisomy 18 (Hội chứng Edwards) dẫn đến sẩy thai trong hầu hết các trường hợp, có liên quan đến nhiều đặc điểm vật lý khác nhau và tuổi thọ chỉ là vài ngày. Trisomy 13 (hội chứng Pätau) cũng được đặc trưng bởi một loạt các đặc điểm thể chất và bất thường, và trong nhiều trường hợp dẫn đến sẩy thai or thai chết lưu. Tuổi thọ của những đứa trẻ được sinh ra chỉ là vài năm. Mục đích của xét nghiệm FISH trước khi sinh là để phát hiện các bất thường về nhiễm sắc thể đã biết ở giai đoạn sớm để cung cấp cho các bậc cha mẹ phương pháp thay thế hợp pháp phá thai để bế đứa trẻ đến hạn. Trong trường hợp vú và gan ung thư, các ung thư biểu mô có thể được kiểm tra để tìm số lượng HER2 / neu tăng lên gen bằng phương pháp thử nghiệm FISH. Nếu dương tính, có sự gia tăng sản xuất các thụ thể yếu tố tăng trưởng đáp ứng với một số liệu pháp hóa học nhất định. Các bài kiểm tra FISH cũng có sẵn để phát hiện các gen bất thường trong tế bào lympho mãn tính bệnh bạch cầu (CLL), cải thiện việc tập hợp các tác nhân hiệu quả cho hóa trị.
Rủi ro, tác dụng phụ và nguy cơ
Bản thân bài kiểm tra FISH không liên quan đến bất kỳ rủi ro hoặc nguy hiểm nào. Chỉ tập hợp các tế bào được kiểm tra bởi sinh thiết hoặc bằng cách chọc ối có liên quan đến nguy cơ nhiễm trùng nhỏ do tính chất xâm lấn của chúng. Điểm đặc biệt là mặc dù xét nghiệm FISH có thể phát hiện một số sai lệch nhiễm sắc thể cụ thể, nhưng không chắc chắn rằng không có sai lệch nhiễm sắc thể nào trong trường hợp kết quả âm tính, vì không phải tất cả các bất thường đều có thể được phát hiện bằng xét nghiệm FISH. Trong trường hợp kết quả xét nghiệm dương tính, cần tuân theo các quy trình chẩn đoán khác để xác nhận hoặc bác bỏ kết quả là sai.
